细胞油红O染色实验方法参考
HepG2细胞油红O染色实验方法参考
油红O染色储备液和工作液配制:
① 0.5%油红O染色储备液配制:
100%异丙醇100 mL + 0.5 g油红O干粉,充分溶解,过滤,密封,4度避光长期保存(1年)。
② 油红O染色工作液配制:
实验前,将储备液与蒸馏水按3:2稀释,过滤(滤纸或极性滤膜配 + 注射器)或者离心(3000 rpm, 5 min),酒红色且无沉淀。(现配现用,避免工作液出现沉淀。)
油红O染色步骤:
1. 处理后的细胞用PBS洗3次,4%中性甲醛室温固定10 min。
2. 油红O染色工作液染色10 – 15 min,避光,染色时需加盖(以免异丙醇挥发)。
3. PBS洗3次。(如背景不干净,选用60%异丙醇洗背景,时间1 min左右,不宜过长。)
4. 显微镜白光下观察拍照。
(对照组) (高脂组)
HepG2细胞油红O染色结果参考